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  • 1. (2022高三下·浙江开学考) 回答下列(一)(二)两题。

    (一)蒙古马以放牧为主,长期生活在草原上,在饲喂方式上以干草为营养来源,具有耐粗饲料的优良特点,能适应极粗放的饲养管理,这种食草特性与其肠道中纤维素分解菌有着密切的联系。研究人员从蒙古马盲肠中分离与筛选纤维素分解菌进行相应研究。回答下列问题:

    1. (1) 取蒙古马盲肠内容物1.0g,用无菌水稀释成合适浓度的菌悬液,取菌悬液均匀涂布于以为唯一碳源的固体培养基平板上。37℃恒温培养箱中培养24h后,采用刚果红染色法(染色纤维素)筛选菌株。最后通过为筛选细菌降解纤维素能力的一个初步标准。
    2. (2) 将初筛结果较好的菌株接种于液体培养基中,该培养基以面积为7cm2的定量滤纸片为唯一碳源,据判断纤维素酶降解效果从而对菌种进一步筛选。
    3. (3) 将筛选出的降解效果较好的菌株接种于液体产酶培养基中,于25℃恒温摇床中180r/min培养,取培养液离心,离心后得到的即为粗酶液。
    4. (4) 对纤维素酶活力测定时,在待测试管中分别加入0.5mL粗酶处理液,在空白对照中加入,在波长为540nm的紫外分光光度计下,测量各个待测样品的,选用540nm波长测定的原因是

      (二)科研人员利用基因工程构建了超量表达蛋白的转基因玉米。在超量表达X基因载体的构建中,所用的含目的基因的DNA片段和根瘤农杆菌Ti质粒的酶切位点如图1所示,其中强启动子具有结合RNA聚合酶且能多次启动转录的功能;X蛋白在不同玉米株系的表达量如图2所示。回答下列问题:

    5. (5) 为使X基因在玉米植株中超量表达,应优先选用酶组合,将目的基因片段插入T-DNA区段,其中T-DNA的作用是
    6. (6) 可在农杆菌培养基中加入卡那霉素以筛选的农杆菌,得到的农杆菌与玉米愈伤组织混合培养,在接下来的筛选过程中,除了以X基因为模板设计探针进行DNA分子杂交外,还可以通过鉴别导入T-DNA序列的愈伤组织。
    7. (7) 筛选出的愈伤组织经过诱导,分化成,最终获得多个转基因玉米株系。在诱导形成愈伤组织和愈伤组织再分化形成植株过程需要更换新的培养基,原因是:。待生根后,将苗移栽至蛭石中,逐渐进行炼苗。
    8. (8) 不同转基因玉米株系中X蛋白表达量差异性可能与有关。(答出两点即可)

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