1. (2016高三上·朝阳期中) 图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，且限制酶的切点是唯一的，外源DNA插入会导致相应的基因失活，请回答下列问题．

1. （1） 基因工程中最常用的载体是，而作为基因表达载体，除图1所示结构外，还需具有．
3. （2） 根据图中所给信息，构建基因表达载体时，应选用的限制酶是．若将基因表达载体导入大肠杆菌，一般用处理，使其处于，以利于吸收周围环境中的DNA分子．
5. （3） 为了筛选含目的基因的大肠杆菌，应在培养基中添加，培养一段时间后，平板上长出的菌落，用PCR技术鉴定时，所用的引物组成为图2中．