1. (2023·玉溪模拟) 第一代DNA测序技术是由桑格等科学家发明的，又称为链终止法测序，科学家用该技术测定了噬菌体X174的基因组序列，操作流程如下图所示，回答下列问题：

1. （1） 将碎片化的DNA片段连接到质粒载体中，需要用到、等工具酶。
3. （2） 为保证放射自显影观察条带，应选用（填“¹⁸O”或“³²P”）标记ddNTP。
5. （3） 在凝胶电泳中DNA分子的迁移速率与DNA分子的、有关。
7. （4） PCR反应终止的原因可能是。