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高中生物学
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综合题
1. 某植物抗虫基因转录的mRNA下游序列已知,但其上游序列未知。现利用PCR扩增该基因,简要流程如图所示,其中①~③表示有关过程,Ⅰ~Ⅲ表示有关物质。请回答下列问题:
(1) 过程①反应体系中需要加入
酶,生成杂合双链物质Ⅰ。
(2) 利用DNA末端转移酶催化过程②,使cDNA单链左侧末端增加十多个腺嘌呤脱氧核苷酸序列AAA(A)
n
, 进而利于过程③扩增获得目的基因序列Ⅲ。在过程③反应体系中还需要添加新的引物,新引物的碱基序列应该是
。
(3) 得到物质Ⅲ后,通常还需在其两端增加
序列,以便切割后与相应的载体重组。将基因表达载体导入大肠杆菌之前,还需用
处理大肠杆菌。
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