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高中生物学
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1.
(2023高三下·清新月考)
维生素A在体内转化为11-顺式视黄醛后,与视网膜特定细胞中的视蛋白结合成视紫红质。视紫红质接受光信号后,11-顺式视黄醛转变为全反式视黄醛,视紫红质构象发生变化,激活细胞内的信号通路,最终产生视觉。全反式视黄醛与视蛋白脱离,经复杂的转运和酶促反应,再度转变为11-顺式视黄醛而被重复利用。最新研究表明,一种G蛋白偶联受体RGR可能参与了视觉产生的某些过程。为研究RGR的作用机理,某研究小组利用基因工程培育出含RGR反义基因(反义基因是通过原基因反向连接在载体的启动子和终止子之间,其转录出的mRNA与原基因转录出的mRNA互补配对)的转基因小鼠(rgr),研究该基因的功能。回答下列问题:
(1) 为构建RGR反义基因重组载体,需先设计引物,通过PCR技术特异性扩增RGR反义基因。为使PCR产物能被限制酶切割,需在引物上添加相应的限制酶识别序列,即在引物A的
(填“3′端”或“5′端”)添加
限制酶识别序列,在引物B添加
限制酶识别序列。
(2) 培养转基因小鼠过程中,将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是
,常用的受体细胞是
,选择培养基中除有动物细胞培养的必需成分,还需要添加
起筛选作用。
(3) 研究人员将正常小鼠(WT)和转基因小鼠(rgr)都平均分成两组,一组在黑暗中饲养12h,另一组在光照下饲养12h;随后测定小鼠眼睛中11-顺式视黄醛、全反式视黄醛和视紫红质的含量,结果如图所示。
据图分析,光照条件下RGR的作用机理可能是
。
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