1.
(2023高二下·余姚月考)
甜玉米与普通玉米相比,甜玉米中可溶性糖向淀粉的转化较慢,含可溶性糖量高, 汁多质脆,富含多种维生素。为了使甜玉米更富有生产应用价值,科研人员通过转基因技术培 育出了超量表达 P 蛋白转基因甜玉米。在超量表达 P 基因载体的构建中,所用DNA 片段和 Ti 质 粒的酶切位点如图所示。
说明:强启动子是一段有特殊结构的 DNA 片段;BamH I 、Hind Ⅲ 、EcoR I 、Not I 、Sac I 代表不同的限制酶;T-DNA 是农杆菌的Ti 质粒上的 DNA 片段。
(1)
为了特异性扩增 P 基因序列,可采用 的方法,一般要加入的原料为。
(2)
强启动子是一段有特殊结构的 DNA 片段,能被识别并结合,驱动 基因的持续转录。
(3)
构建能超量表达 P 基因的载体,需选用 限制酶的组合和 DNA 连接酶。将重组 Ti 质粒转入农杆菌,需先将农杆菌用处理。
(4)
将玉米愈伤组织经农杆菌液浸泡,超量表达 P 基因会随T-DNA, 从而获得转基因植物细胞。继而进行植物组织培养,培养基中需加入 进行筛选, 筛选出的愈伤组织经 过程形成丛芽,然后在 (填激素名称)较多的培 养基上形成根,最终获得多个玉米株系。发现某株系的 P 蛋白表达量较低,请对该现象作出 合理的解释:。