1. (2023高三·重庆模拟) 设计引物是PCR技术中至关重要的一环。设计的引物能与模板链目的位点互补结合，但不能在非目的位点与DNA结合，要防止引物之间或自身互补配对形成二聚体或折叠后互补配对形成发夹结构。回答下列有关引物及引物设计的问题：

1. （1） PCR中，引物的作用是。
3. （2） 下图1所示的引物中，其中一种设计不合理，原因是。

   

5. （3） DNA分子杂交时需要单链DNA探针，常用不对称PCR来制备。不对称PCR中使用的一对引物的量不相等，其中少的称为限制性引物，多的称为非限制性引物，开始扩增出的是双链DNA，后来扩增出的是单链DNA.下图2中，α链为所需的DNA分子探针，应选用引物作非限制性引物；已知图示DNA有n个，前10次循环的产物为双链DNA，后10次循环的产物是单链DNA，则最终可获得个所需的单链探针；常用法来鉴定PCR的产物。

   

7. （4） 下图表示利用基因工程生产某药用蛋白过程中使用的质粒及目的基因的部分结构，β-半乳糖苷酶能分解无色的X-gal产生蓝色物质。图中显示，氨苄青霉素抗性基因、β-半乳糖苷酶基因、目的基因的序列中分别含有1种、5种、2种限制酶的识别序列及切割位点。

   

   在设计PCR引物时添加限制酶的识别序列，使扩增得到的目的基因首端、末端能分别被这两种酶识别并剪切，得到与质粒相同的黏性末端，以确保目的基因与质粒载体正确连接。写出筛选出成功导入目的基因的工程菌的思路：。