1. (2023高二下·浙江月考) 手足口病是一种由肠道病毒引起的传染性疾病。肠道病毒71型（EV71）是其主要病原体之一，因其具有嗜神经性，严重者可出现神经系统并发症。目前临床上没有针对EV71的特效药，本实验旨在通过制备EV71相关抗血清，为开发EV71亚单位疫苗（微生物的成分或产物）提供支持。

实验材料：若干健康小鼠、EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2、非EV71蛋白、生理盐水、注射器（抗原﹣抗体结合强度检测方法不作要求）。

实验思路：

Ⅰ.取若干生长状况相同的健康小鼠，随机均分为1～4四组；

Ⅱ.①____；

Ⅲ.将各组小鼠饲养在适宜环境下，多次重复步骤Ⅱ，等量提取各组小鼠的血清，测定血清与等量②____、③____、④____、非EV71蛋白的结合强度；

Ⅳ.记录并分析实验结果。

1. （1） 完善实验思路①；②；③；④。
3. （2） 根据部分实验结果绘制柱形图，如图所示：

   

   请分析：

   ①预测第1、2组与VP1的结合强度，并在图中补充柱形图。

   ②将EV71灭活病毒注射到小鼠体内，能激活机体第三道防线中的 免疫，其中淋巴细胞增殖分化主要发生在 中；实验过程多次重复步骤Ⅱ，目的是 。

   ③测定第1～3组小鼠血清与非EV71蛋白的结合强度，目的是 ；

   ④根据上述实验，以 成分为目标制备EV71亚单位疫苗效果较佳。