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高中生物学
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综合题
1.
(2023·沈阳模拟)
“多发性骨性连接综合征”是由编码成纤维细胞生长因子(FGF9)的基因突变所致,患者FGF9基因中某碱基对发生替换,使FGF9中相应的氨基酸发生替换。科研人员欲利用基因工程等技术获得含有该突变基因的模型小鼠,用来研究该病的发病机理。图1表示FGF9cDNA(由FGF9基因转录得到的mRNA逆转录而来)进行定点突变得到突变型FGF9cDNA的流程,图2为研究中所用的质粒(SpeI、HindⅢ、SmalI和BglⅡ分别代表相应的限制酶切割位点,以上限制酶切割产生的粘性末端不同)。请回答下列问题:
(1) 图1虚线方框中的a链与d链在延伸过程中的作用是:既可作为
又可以起到相当于
的作用,使
酶能够从a链与d链的3'端开始连接脱氧核苷酸。经PCR后获得的产物一般通过
来鉴定。
(2) 基因工程操作的核心步骤是
。图2质粒中的C序列是
,它是RNA聚合酶识别和结合的部位。图1中突变型FGF9cDNA的a链所在的DNA单链为转录的模板链,则引物1和引物4的5'端需分别添加
酶的识别序列,才能与图2中的质粒正确连接。
(3) 将构建的重组DNA分子通过
技术导入受精卵,再经
(答1点即可)等技术使其发育成模型小鼠。
(4) 科研人员发现,已转入突变型FGF9cDNA的模型小鼠并未表现出“多发性骨性连接综合征”,从分子水平上寻找原因需采用的技术有
。(答出2点)
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