1. (2023·金华模拟) P24是HIV病毒颗粒的主要结构蛋白（大小约为26KD），是P24基因的表达产物。P24单克隆抗体在HIV感染的诊断、治疗等方面有重要意义，P24单克隆抗体的制备主要包括三个阶段：利用基因工程生产P24蛋白；利用细胞融合技术生产单克隆抗体；单克隆抗体活性的鉴定。请回答下列问题：

1. （1） 提取HIV的总RNA，经过程获得总cDNA。通过PCR技术可在总cDNA中专一性的扩增出P24基因的cDNA，原因是。
3. （2） 在构建重组质粒时，需对质粒和P24基因的cDNA用BamHI和XhoI进行双酶切，双酶切的优点是研究发现，P24基因的cDNA缺乏这两种限制酶的识别序列。为此，在设计PCR引物时，需要。
5. （3） 将重组质粒（含卡那霉素抗性基因）导入宿主菌体细胞后，进行的部分操作及结果如下图所示。图中①②两处的接种方法（填“相同”或“不同”），在固体平板培养基上能生长的菌落不一定能合成P24，其原因是。蛋白凝胶分析结果图中，1为蛋白Marker，2为不含物质A的菌液，3为含物质A的菌液，实验结果说明P24较高的是（填“2”或“3”），据此推测物质A的作用是。

   

7. （4） 用P24蛋白对小鼠以静脉注射的方式进行加强免疫3次，其目的是。取免疫后小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞，用促融，并经HAT培养基筛选获得杂交瘤细胞。进一步筛选时，需先对含杂交瘤细胞的培养液进行稀释，然后用抗原—抗体杂交技术进行检测，筛选出具有特性的细胞。再将所得细胞进行克隆培养，进而获得P24单克隆抗体。克隆培养的关键是。
9. （5） T细胞被HIV感染后，会与未被感染的T细胞发生融合，从而形成多核巨细胞，多核巨细胞不久死亡又释放出大量新病毒。多核巨细胞的数量可作为P24单克隆抗体活性鉴定的指标。请完善以下鉴定P24单克隆抗体活性的实验思路：

   ①将未被感染的T细胞等分为三组，处理如下：

   A组：HIV感染的T细胞+未被感染的T细胞+细胞培养液；

   B组：HIV感染的T细胞+未被感染的T细胞+；

   C组：未被感染的T细胞+细胞培养液；

   ②48小时内每隔8小时测定三组的多核巨细胞的数量，并进行统计分析。若P24单克隆抗体能有效抑制多核巨细胞的形成，请预测实验结果（以坐标曲线图的形式画出）。