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  • 1. (2023·广东模拟) 我国的生猪产量约占世界的一半。2018年8月,我国首次报告非洲猪瘟疫情(由ASFV病毒感染猪肺泡巨噬细胞引起的一种急性、高度致死性传染病,全世界尚未研制出安全有效的疫苗):截至2021年,我国累计扑杀非洲猪瘟感染生猪超过100万头一我国科研人员在ASFV病毒的K基因(大小为790bp)中间插入荧光素酶基因(Gluc)和增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP),构建了可观察及定量检测酶活性的重组病毒(ASFV-Gluc-EGFP)体系,如左图所示,实现了ASFV病毒的快捷高效检测。

    回答下列问题:

    1. (1) 左图中的Hind Ⅲ和BamH I能切开两个核苷酸之间的磷酸二酯键,它们属于基因工程的(工具酶),Gluc基因和EGFP基因有助于重组病毒的筛选,起到基因表达载体中(填结构)的作用。
    2. (2) 为初步鉴定重组病毒是否构建成功,科研人员对ASFV病毒和重组病毒进行PCR扩增和电泳鉴定扩增过程中,引物的作用是。电泳得到右图中的1号和2号两种条带,其中属于重组病毒PCR产物的条带是号。
    3. (3) 为进一步验证重组病毒是否成功表达,科研人员将重组病毒接种到细胞并培养一段时间,培养过程中所需的气体主要有。要分别检测Gluc和EGFP两种基因是否成功表达,前者需要采用的方法有,后者则可通过观察有无绿色荧光进行判断。

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