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  • 1. (2023·广东模拟) 习近平总书记在参加十四届全国人大一次会议江苏代表团审议时强调,“农业强国是社会主义现代化强国的根基,推进农业现代化是实现高质量发展的必然要求”。目前,资源要素投入对粮食产量提升的驱动力明显减弱,亟须转基因等前沿技术新突破为保障粮食安全注入新动能。2023年,我国转基因大豆、转基因玉米的产业化试点已进一步扩大。如图所示是转抗草甘膦基因——cp4-epsps大豆培育时利用的质粒和目的基因。回答下列问题:

      

    1. (1) 用PCR获取抗除草剂基因时,连续扩增循环5次,需要的引物数为个,在引物中加入限制酶识别的碱基序列时,应加在引物的端。
    2. (2) 已知限制性内切核酸酶BamHI、BclI、Sau3AI、HindII识别的碱基序列分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT,质粒与含抗除草剂基因的DNA片段中限制酶的切割位点如图所示,处理质粒和目的基因时选用的限制酶为。若质粒中无位于左侧的HindIII切割位点,则对限制酶的最佳选择为
    3. (3) 若转化方法为农杆菌转化法,所用载体与图1最大的不同是质粒中一定含有片段,并且用于切割质粒的限制酶其识别序列与该片段的位置关系为
    4. (4) 可以将新鲜的从叶片上取下的圆形小片与农杆菌,筛选出转化成功的细胞后进行植物组织培养时,在不同时期使用的培养基存在差异,不同培养基最大的区别是

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