1. (2023高二下·广西月考) 纤维素酶广泛应用在纺织、能源、食品等领域，提高纤维素酶的热稳定性可提高反应温度，加快降解速度研究耐热纤维素酶在工业生产上具有重要意义。嗜热梭菌是一种高温厌氧细菌，其产生的β-葡萄糖苷酶（bglB）是一种耐热纤维素酶，科研人员将bglB基因转入大肠杆菌，构建了耐高温的纤维素酶大肠杆菌。回答下列问题：

1. （1） 利用PCR扩增bglB基因时，每次循环一般分为变性、和三步，其中变性的目的是。
3. （2） 下图为质粒的限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，bglB基因两端需要分别引入和限制酶的识别序列。将重组质粒导入大肠杆菌前，一般先用Ca²⁺处理大肠杆菌细胞，目的是。

     

5. （3） 将筛选到的转bglB基因大肠杆菌进行耐高温实验，结果如图2所示。在工业生产上，为提高纤维素降解速率，最好将温度控制在℃。