1.
(2023·新课标卷)
某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具，将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示。
下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是（ ）
A . 质粒和目的基因都用酶3切割，用E coli DNA连接酶连接
B . 质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接
C . 质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接
D . 质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E coli DNA连接酶连接
