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  • 1. (2023高二下·常熟期中) 新冠病毒是一种单链RNA病毒,常用“荧光RT-PCR技术”(实时荧光逆转录聚合酶链式反应)进行检测,如图1所示。该过程中当TaqMan探针完整时,荧光基团(R)发出的荧光信号被淬灭基团(Q)吸收而不发荧光;当探针水解释放出游离的R和Q,R发出的荧光信号被相应仪器检测到,荧光信号的累积与PCR产物数量完全同步。请分析并回答下列问题。

    1. (1) “荧光RT-PCR技术”所用的试剂盒中应该含有:检测者mRNA、荧光标记的新冠病毒核酸探针、、2种引物、含(离子)的缓冲体系。
    2. (2) PCR循环中,加入的引物作用是。引物、探针与模板结合发生在阶段。探针核苷酸序列的设计依据是
    3. (3) 每扩增一个DNA便释放一个荧光信号,从而实现荧光信号的积累与PCR产物的完全同步。最终可以得到一条荧光扩增曲线,如图2所示。荧光一般要达到或超过阈值时才确诊为感染了新冠病毒。现有甲、乙两个待检样本,检测时都出现了图示形态的曲线,但甲的a点比乙的a点明显左移。在试剂盒合格且正常,操作过程规范且准确的前提下,该现象出现的原因是甲样本中的新冠病毒含量较,达到阈值所需的循环数更
    4. (4) 常采用来鉴定PCR的产物,设置如下:1号泳道为标准(Marker),2号泳道为阳性对照组,3号泳道为实验组。图3中3号泳道出现杂带,原因一般有(至少写出2点)

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