1. (2023高三下·浙江月考) Bt基因为苏云金芽胞杆菌基因，因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的杀虫基因。以下为培育转Bt基因抗虫棉幼苗的基本操作过程：请分析回答：

1. （1） 目的基因的获取从基因组文库中获取目的基因，建立基因组文库需用到酶：也可以从cDNA文库中获取，从其中获取的Bt基因因为缺少而不利于其在受体细胞中表达；还可以提取作为模板，通过PCR技术获得。
3. （2） 构建基因表达载体基因表达载体应具有有利于整合Bt基因。为了方便筛选含有Bt基因的细胞以及使Bt基因能独立复制并稳定存在细胞中，作为表达载体应含有及。
5. （3） 将目的基因导入受体细胞通常用农杆菌转化法将外源基因导入到植物细胞，将的农杆菌与棉花的愈伤组织细胞混合进行转化，影响转化效率的因素有(A.重组Ti质粒大小B.愈伤组织的生理状态C.培养基的物理性质D.农杆菌的活性)。然后用处理以去除农杆菌及筛选含有目的基因的愈伤组织细胞。也可将愈伤组织细胞放在较高渗透压甘露醇溶液内，通过机械法或酶解法获得，采用技术将外源基因导入细胞。
7. （4） 检测目的基因及其表达产物可制备作为基因探针，利用技术检测棉花细胞中是否存在Bt基因。利用作为抗原，制备单抗来检测Bt基因是否表达。