利用酵母菌生产青蒿酸,可从青蒿基因组中获得酶基因和CYP71AV1酶基因,并将其与载体连接构建出酵母菌表达载体(示意图如图2),表达载体中除了图中所示的组成结构外,还应包含,以便启动目的基因表达。
①方案一:已知URA3为乳清苷-5-磷酸脱羧酶基因,其控制合成的酶能将5-氟乳清酸转化为5-氟尿嘧啶,使细胞中毒死亡。欲利用URA3筛选含目的基因的酵母菌,可将待选酵母菌分别影印接种在的甲、乙2个培养基中,进行对比观察。培养后发现甲中含有菌落,乙相应位置不含菌落,则甲中对应位置的菌落(填“是”或“不是”)目标菌落。
②方案二:提取酵母菌的总DNA,利用技术扩增,经获得的条带与标准条带比对后进行判断,也可直接通过技术鉴定扩增产物。