1. (2023高二下·湖州期末) 猕猴桃风味独特，营养丰富，Vc含量高，是20世纪由野生到商业栽培最成功的驯化植物之一。回答下列问题：

1. （1） 猕猴桃雌雄异株，个体基因型高度杂合，可通过种内育种使双亲基因重组，产生高度变异的新品种猕猴桃。在进行人工栽培品种与野生毛花猕猴桃远缘种间杂交时发现近九成种子胚发育中止，这可能是因为它们之间存在。若要使该胚继续发育获得植株，可采用的方法是。
3. （2） 利用农杆菌转化法将抗虫基因导入猕猴桃愈伤组织，培育出抗虫猕猴桃新品种。

   若要获得已知序列的抗虫基因，可采用或PCR扩增的方法。为确保抗虫基因正确连接到农杆菌的Ti质粒上并保持结构稳定，构建表达载体时需选用2种限制酶，一般选择的原则有（多选）。

   A．抗虫基因内每种限制酶只有一个切割位点    B．受体农杆菌细胞中不含有该种限制酶

   C．酶切后，Ti质粒形成的两个末端序列不相同    D．为利于切割，限制酶识别的碱基序列长度越短越好

   将含有重组Ti质粒的农杆菌与猕猴桃愈伤组织混合培养，使整合到猕猴桃基因组中，完成转化实验。筛选出的愈伤组织经过形成胚状体，可进一步发育形成转基因植株。

5. （3） 利用品质优良的猕猴桃与抗寒性极强的软枣猕猴桃进行体细胞杂交，得到适应低温地区栽种的优良新品种，其部分过程如下：

   原生质体的游离与纯化：将外植体，加入含有甘露醇溶液的酶溶液中处理，一段时间后过滤取滤液。将滤液低速离心，吸除上层的细胞碎片及，将沉淀物反复悬浮、离心，得到提纯的原生质体。为防止原生质体而影响融合效果，应尽快诱导两个猕猴桃品种的原生质体融合。

   原生质体融合：为增加异源融合的机会，将提取纯化的两种原生质体混合，通过添加适宜浓度的化学诱导剂促进融合，筛选出杂交细胞后进一步培养可得到体细胞杂交植株。