1. (2023高二下·吉林期末) 科研人员将寒带地区海鱼体内的抗冻基因导入千禧果（一种番茄品种）细胞，成功培育出抗冻千禧果。下图为培育过程中使用的Ti质粒示意图，其中Vir区的基因活化能促进的加工和转移。回答下列问题：

1. （1） 将抗冻基因的mRNA逆转录后，再进行PCR可获得抗冻基因，该过程中所需要的酶是。每次PCR循环分为3步，其中所需温度最低的一步称为，PCR扩增抗冻基因时需要添加特异性引物，目的是。
3. （2） 抗冻基因不能直接导入受体细胞，需要构建抗冻基因表达载体。构建抗冻基因表达载体的目的是（答出1点）。
5. （3） 选择图中Ti质粒构建基因表达载体时，不能选择限制酶Ⅱ切割Ti质粒，原因是，最好选择限制酶构建基因表达载体。
7. （4） 为筛选成功导入抗冻基因的千禧果细胞，最好在培养基中添加。将成功转化的千禧果细胞诱导培育成植株，最后在条件下筛选出具有抗冻性状的千禧果植株。