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  • 1. (2023高二下·长春期末) PCR转基因检测技术被多国检测工作者使用,该技术通常包括核酸提取、核酸扩增、扩增产物检测3个步骤。某研究小组设计并完成了“转基因抗草甘膦大豆定性PCR检测”实验,请参与实验设计并回答相关问题(草甘膦为常用除草剂;转基因抗草甘膦大豆的外源基因构建图如图1所示):

    (PO为外源启动子、NOS为外源终止子、CP4-EPSPS为外源基因)

    1. (1) 提取DNA:取待测大豆组织裂解破碎,进行DNA提取和纯化,得到待测大豆基因组DNA。该过程的常用的试剂有EDTA、SDS、NaCl、酒精等。在研磨液中加入NaCl的目的是,提取到的DNA可以用试剂鉴定。
    2. (2) DNA扩增:

      ①该小组拟定的引物设计如表所示,其中有一个基因的引物设计是不科学的,该基因是;不科学的原因是

                                                                                                                            

      基因

      引物序列

      PO

      F-5'GGGATT-3'

      R-5'AATCCC-3'

      NOS

      F-5'GAATCCTGTTGCCGGTCTTG-3'

      R-5'TTATCCTAGTTTGCGCGCTA-3'

      CP4-EPSPS

      F-5'CTTCTGTGCTGTAGCCACTGATGC-3'

      R-5'CCACTATCCTTCGCAAGACCCTTC-3'

      ②PCR扩增:在反应体系中分别加入模板、相应引物、酶、等,在设定的PCR体系下可以特异性扩增目标DNA片段。

    3. (3) 扩增产物检测:扩增得到的PCR产物一般先通过对产物进行初步鉴定.在凝胶中DNA分子的迁移速率与等有关。

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