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  • 1. (2023高二下·合肥期末) 脑血栓是威胁人类健康的常见疾病,研究发现人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和脑血栓的急救药。通过基因工程技术可以大量制备基因工程药物t-PA。

    1. (1) 研究人员采用PCR技术可以获得大量t-PA基因,PCR的原理是 , 此外,除上述外获得t-PA基因的方法还有(答出1种即可)。
    2. (2) 研究表明,为心梗患者注射大量t-PA会诱发颅内出血,其原因在于t-PA与纤维蛋白结合的特异性不高,若将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,能显著降低出血副作用。据此,先对天然的t-PA基因进行序列改造,然后再采取传统的基因工程方法表达该改造后的基因,可制造出性能优异的改良t-PA蛋白。(注:如图乙表示相关的目的基因、载体及限制酶。pCLY11为质粒,新霉素为抗生素。)请回答下列问题:

      ①以上制造出性能优异的改良t-PA蛋白的过程被称为。已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板链碱基序列为ACA,而丝氨酸的密码子为UCU,因此改造后的基因决定第84位丝氨酸的模板链的碱基序列应设计为

      ②如图所示,需选用限制酶XmaI和切开质粒pCLY11,才能与t-PA改良基因高效连接。与单一酶酶切相比,本操作采用的双酶切方法的优点是

    3. (3) 将连接好的质粒DNA导入大肠杆菌,含t-PA改良基因重组质粒的细胞应具有的性状是____。
      A . 新霉素抗性且呈蓝色 B . 新霉素敏感且呈蓝色 C . 新霉素抗性且呈白色 D . 新霉素敏感且呈白色

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