1. (2023高二下·宜宾期末) 磷是植物生长的重要元素，施入土中的磷大多数与Ca²⁺等离子结合形成难溶性磷酸盐。科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程见下图，请回答下列问题：

1. （1） 在步骤①过程中涉及到的无菌操作有（答出2点即可）。
3. （2） 步骤④中的培养基的成分是：葡萄糖、(NH4)₂SO₄、NaCl、MgSO₄·7H₂O、KCl、FeSO₄·7H₂O、MnSO₄、Ca₃(PO₄)₂、琼脂粉等，此培养基满足了细菌生长对的营养要求。加入Ca₃(PO₄)₂的目的是。
5. （3） 步骤④所用的接种工具是。⑤的接种方法在第二次及以后划线后，没有得到菌落的原因是。
7. （4） 经步骤③最后一次稀释后，该土壤中的微生物被稀释了倍。
9. （5） 步骤④中待菌落长好后挑出溶磷圈直径（D）与菌落直径（d）比值较的菌落。通常情况下，对④和⑤获得的纯菌种可以依据菌落的形状、大小、颜色等对细菌进行初步的鉴定和分类，原因是。