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高中生物学
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1.
(2023·江苏)
为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达,运用重组酶技术构建质粒,如图1所示。请回答下列问题:
(1) 分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时,配制的两个反应体系中不同的有
,扩增程序中最主要的不同是
。
(2) 有关基因序列如图2.引物F2-F、F1-R应在下列选项中选用____。
A .
ATGGTG------CAACCA
B .
TGGTTG------CACCAT
C .
GACGAG------CTGCAG
D .
CTGCAG------CTCGTC’
(3) 将PCR产物片段与线性质粒载体混合后,在重组酶作用下可形成环化质粒,直接用于转化细菌。这一过程与传统重组质粒构建过程相比,无需使用的酶主要有
。
(4) 转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选,下列叙述错误的有____。
A .
稀释涂布平板需控制每个平板30~300个菌落
B .
抗性平板上未长出菌落的原因一般是培养基温度太高
C .
抗性平板上常常会出现大量杂菌形成的菌落
D .
抗性平板上长出的单菌落无需进一步划线纯化
(5) 为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计,用不同菌落的质粒为模板,用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增,质粒P1~P4的扩增产物电泳结果如图3.根据图中结果判断,可以舍弃的质粒有
。
(6) 对于PCR产物电泳结果符合预期的质粒,通常需进一步通过基因测序确认,原因是
。
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