1. (2023高三上·浙江模拟) 脱水素是青稞植株中的一种抗冻物质，脱水素基因Dhn4的结构如图1所示，其中B链为模板链。研究人员利用图2所示的质粒，通过农杆菌转化法将该基因导入草莓中，成功培育出了抗冻草莓植株。

（XhoI、KpnI、PstI为三种不同黏性末端的限制酶识别位点；amp'基因为氨苄青霉素抗性基因）

回答下列问题：

1. （1） 获取目的基因提取青稞细胞的，经过程获得cDNA。在PCR扩增Dhm4时应选择的引物组合是，为使扩增后的产物按照正确方向与质粒连接，需在引物的（填“5'”或“3'”）末端分别添加限制酶的识别序列。
3. （2） 构建基因表达载体启动子的作用是；多种因素会影响Dhn4与质粒的连接效率，如温度与pH等操作环境、反应时间、质粒浓度及（举两例即可）等。
5. （3） 导入、筛选受体细胞将重组质粒导入用处理过、处于感受态的农杆菌内，然后在含的培养基上培养、筛选农杆菌，再将阳性农杆菌与草莓叶片共培养，完成实验。
7. （4） 转基因植株的培育与检测转基因草莓叶片经脱分化形成，然后通过调整培养基中的（填植物激素类型）配比，最终获得幼苗。可通过处理，从个体水平对转基因是否成功进行检测。