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  • 1. (2023高三上·硚口开学考) IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某重症联合免疫缺陷〈SCID)患儿IKK基因编码区第1183位碱基T突变为C,导致IKK上第395位酪氨酸被组氨酸代替。为研究该患儿发病机制,研究人员利用纯合野生鼠应用大引物PCR定点诱变技术培育出SCID模型小鼠(纯合),主要过程如图甲、乙、分析回答下列问题:

    1. (1) 在图甲获取突变基因过程中,需要以下3种引物:

      引物A

      5'-CCCAACCGGAAAGTGTCA-3'

      (下划线字母为突变碱基)

      引物B

      5'-TAAGCTTCGAACATCCTA-3'

      (下划线部分为限制酶HindⅢ识别序列)

      引物C

      5'-GTGAGCTCGCTGCCCCAA-3'

      (下划线部分为限制酶SacⅠ识别序列)

      则PCR1中使用的引物有,PCR2中使用的引物有和图中大引物的(填“①”或“②”)链。

    2. (2) 将突变基因导入小鼠受精卵最有效的方法是
    3. (3) 研究人员经鉴定、筛选获得一只转基因杂合鼠F0 , 并确认突变基因已经稳定同源替代IKK基因。利用杂交鼠F,通过杂交获得SCID模型鼠,请将实验步骤补充完整;

      ①杂交亲本:,杂交得F1

      得F2

      ③提取F2每只小鼠的基因组DNA,采用分子生物学方法,利用IKK基因探针和突变基因探针进·行筛选,则的为模型鼠。

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