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  • 1. (2023·宁波模拟)  某DNA病毒对动物养殖业危害十分严重。研究人员拟以该病毒抗原蛋白A来制备单克隆抗体,以期快速检测该病毒,其主要技术路线如图所示。

      

    回答下列问题:

    1. (1) 获取基因A:用于制备蛋白A的基因称为,获取该基因的常用方法是先建立,用一定方法“钓取”相应基因克隆片段后通过技术扩增,扩增的原料是。下列对引物的叙述错误的是

      A.两个引物之间不应有互补性    B.引物自身不存在互补序列

      C.引物与模板链复制起始端碱基互补    D.引物的碱基包含AGCU四种

    2. (2) 工程菌转化:将工程菌放于低温、低浓度溶液中,造成细胞膜通透性改变,成为细胞,通过一定手段将外源DNA导入细胞完成转化。
    3. (3) 筛选获得杂交瘤细胞:在杂交瘤细胞筛选中,常使用特殊选择培养基如培养基,该培养基对两类细胞的存活和繁殖具有抑制作用。
    4. (4) 特定杂交瘤细胞的培养和单克隆抗体的筛选:特定杂交瘤细胞培养常用搅拌式发酵罐,培养时需注意控制如等条件(写出2点)。发酵罐中营养物质通常需加入葡萄糖、氨基酸、激素、无机盐和,以及诱导抗体分泌的化学物质,如丁酸钠。发酵罐内细胞增殖形成(细胞株/细胞系),其分泌的抗体可利用技术筛选。罐内上清液中单克隆抗体含少量杂质,可采用方法纯化。

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