1. (2023高三上·绍兴月考) 人促红细胞生成素（EPO）是一种可用于治疗肾性贫血的糖蛋白类激素，可用乳腺生物反应器生产 EPO。为了避免外源 EPO 基因随机整合到染色体 DNA 上， 科研人员设计和构建了大鼠染色体定位整合克隆载体，利用大鼠乳清酸蛋白（WAP）基因上游的调控序列及启动子和 3′UTR 序列构建了基因表达载体。构建前，科研人员扩增了 WAP 基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入 EPO 基因中，以确定 WAP 基因启动子的具体位置，相关信息如图所示。

1. （1） 在扩增 WAP 基因上游不同长度的片段时，PCR 反应体系中通常都应该含有酶、dNTP、Mg2+、缓冲剂系等。在反应过程中，反应体系中加入 dNTP 的作用是为扩增提供。
3. （2） 为将扩增后的产物定向插入到基因表达载体中，以指导 EPO 基因的表达，需要在引物末端添加特定的限制酶识别序列。由图中信息可知，在 P1～P4 末端添加的序列所对应的限制酶是，在 A 末端添加的序列所对应的限制酶是。
5. （3） 将 PCR 后得到的含不同长度的 WAP 基因上游序列与 EPO 基因连接，构建成基因表达载体，这一过程共需要种酶参与。检测转基因雌性大鼠时发现，导入含 P1～P3 与A扩增产物的个体乳汁中有 EPO，而含 P4 与 A 扩增产物的个体没有 EPO 生成。含 P4 与A扩增产物的个体没有 EPO 生成的原因是。
7. （4） 该实验中，在 EPO 基因上游插入大鼠 WAP 基因启动子的理由是。
9. （5） 科研人员不选用大肠杆菌作为该实验的受体细胞，从基因表达的角度分析，其原因是。