1. (2024高二下·怀仁期末)  科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ四种限制性内切核酸酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为氨苄青霉素抗性基因），其中①~④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，甲、乙表示相关结构或细胞。请据图作答：

  

1. （1） 在构建重组DNA时，可用一种或多种限制性内切核酸酶进行切割，为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实验中应该选用限制性内切核酸酶分别对鱼抗冻蛋白基因和质粒进行切割。
3. （2） 基因工程中的核心步骤是（填序号）。为了使目的基因正常表达，其上游必须有启动子，它是识别和结合的部位。若限制酶切出了平末端，要选择进行连接（填“E.coliDNA连接酶”或“T₄DNA连接酶”）。
5. （3） 图中将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞的方法称为。它是利用载体Ti质粒中含有，可以将目的基因整合到宿主细胞的染色体DNA上。
7. （4） 检测番茄植株细胞中鱼抗冻蛋白基因是否成功表达，从分子水平上常采用的方法是.