1. (2024高三上·哈尔滨期末) 油菜素内酯被认为是第六类植物激素，广泛分布于植物体内，其能促进细胞生长、细胞分裂和农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因（如 P450基因和红霉素抗性基因）的表达和酶活性都得到了提高，在这些基因指导下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质，有的则被直接排出体外。根据以上信息，研究人员进行了如下实验操作，请回答下列问题：

1. （1） 用 PCR扩增获取目的基因，首先要制备2种引物，为提供结合位点，并从引物端（填“5”或“3”）开始拼接单个的脱氧核苷酸。
3. （2） 在构建重组质粒1时，最好用两种不同的限制酶进行切割，这样可以有效防止酶切产物。将构建的重组质粒2与用处理的受体细菌混合，从而将目的基因导入受体细菌，且在受体细菌内该过程称为转化。
5. （3） 培养菌落的实验过程中，应向培养基中加入可将含有目的基因的细菌筛选出来，图中将受体细菌的菌液接种到培养基上的方法是。