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  • 1. (2024高三上·宝应期末)  某研究小组利用转基因技术,将红色荧光蛋白基因(RFP)插入含Gata3基因的载体中,载体和目的基因所在DNA上的限制酶识别位点及PCR扩增使用的相关引物如图甲所示。实验获得能正常表达两种蛋白质的杂合子雌、雄小鼠各一只,利用荧光蛋白活体成像系统进行检测,发现两者均为阳性RFP转基因小鼠。回答下列问题:

    1. (1) 为了使RFP基因能正确插入载体中,在PCR扩增RFP编码区序列的过程中,需要设计引物F和R,在两个引物的(填“3”或“5”)端需分别插入的限制酶识别序列。
    2. (2) 引物的另一端将会进行的过程是在酶的催化下,以为模板将
    3. (3) 在RFP基因的扩增及重组载体的构建过程中,共需要种酶的参与。
    4. (4) 将实验获得的两只雌、雄杂合子小鼠(P)进行杂交获得若干F1 , 利用荧光蛋白活体成像系统检测后,随机取阳性小鼠并随机进行交配获得8只F2小鼠,其表型及比例为阳性:阴性=5:3,为从F2阳性小鼠中获得Gata3-RFP基因纯合子小鼠,研究人员从这些阳性小鼠中提取Gata3基因相关DNA片段,设计了引物A和C用于PCR扩增,扩增产物如图乙所示,则号小鼠是Gata3-RFP基因纯合子小鼠。若用引物A和引物B进行PCR,(填‘能”或“不能”)更好地区分杂合子和纯合子。

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