1. (2024高三上·长沙期末) 酵母菌絮凝是指菌体细胞间通过细胞壁相互黏附、聚集成团的现象。适当提高酵母菌的絮凝能力，有助于发酵结束时细胞和产物的分离，可大幅节约生产成本。科研人员研究了R基因对酵母菌絮凝能力的影响。

1. （1） 啤酒生产中，酵母菌产酒过程的反应式为：C₆H₁₂O₆→。
3. （2） 科研人员利用基因工程技术获得R基因被敲除的酵母菌菌株。

   ①构建含有卡那霉素抗性基因的重组质粒，用LiCl处理酵母菌，使其处于一种能吸收周围环境DNA分子的生理状态，以实现。质粒上的卡那霉素抗性基因通过重组，替换酵母菌的R基因。

   ②利用含有卡那霉素的培养基获得单菌落。挑取单菌落，提取DNA，利用PCR技术进行扩增，以确定酵母细胞的R基因是否被成功敲除。若单菌落扩增后的DNA样品电泳结果如图1，则图2中对应泳道1和泳道2的引物组合分别为(填序号)。

5. （3） 科研人员对野生菌株和R基因敲除菌株的酒精发酵能力和絮凝能力进行了测定，结果如表。

   

   ①检测酒精发酵能力时，将菌液接种到装有麦芽汁的锥形瓶中，11 ℃静置发酵7天。发酵期间，每个锥形瓶应注意保持条件和定时排气。

   ②实验结果表明，获得的R基因敲除菌株符合生产需求，依据是。

7. （4） 科研人员进一步研究R基因影响絮凝能力的作用机制。

   ①将R基因敲除菌株和野生菌株分别用水进行梯度稀释。将不同浓度梯度的酵母菌液点样于含30 μg/mL钙荧光白(细胞壁组装抑制剂)并添加了凝固剂的YPD平板培养基上，培养适当时间后结果如图3。

   

   ②综合上述实验结果，推测R基因敲除菌株絮凝能力变化的原因是。

9. （5） 若要将R基因敲除菌株应用于工业生产制作啤酒，请尝试提出一个还需要进一步研究的问题：。