1. (2024高三上·徐州期末) 利用新冠病毒（SARS-CoV-2）包膜表面的S蛋白研发的疫苗已在我国广泛接种。下图表示制备疫苗的相关过程，其中m、n分别是启动子和终止子，箭头处是限制酶的切点，SUC2是酵母菌的蔗糖转化酶基因，其终产物存在于液泡中，可以催化蔗糖水解成单糖被细胞利用。下表是可供选择使用的限制酶及其识别序列和切割位点。

限制酶	BamHI	NheI	NcoI	SphI	Sau3AI
识别序列和切割位点	5'-G↓CTAGC-3'	5'-G↓GATCC-3'	5'-C↓CATGG-3'	5'-GCATG↓C-3'	5'-↓GATC-3'

1. （1） 上图②过程所使用的两种酶是，选择两种酶切割的优点是。
3. （2） 由上图推测，目的基因S表达的模板链是a链，理由是；该目的基因的表达离不开m，原因是。
5. （3） RT-PCR是将RNA逆转录（RT）和聚合酶链式反应（PCR）相结合的技术。利用S蛋白的RNA作为模板进行过程①，首先需要加入缓冲液、原料、酶I、引物I等物质后进行RT，获得单链DNA后，还需要添加与单链DNA互补的引物II及酶II，在PCR过程中酶I所处的状态是。以一个单链DNA为起点，进行n次循环的扩增，理论上需要个引物Ⅱ；PCR每次循环一般可以分为变性、、延伸三步。
7. （4） SUC2作为B上的标记基因，可以对导入B的酵母菌进行筛选。筛选时，需要使用以蔗糖为唯一碳源的培养基，对受体突变型酵母菌的要求是。
9. （5） 与普通灭活或减活疫苗相比，上述方法制备的疫苗对人体更安全，主要原因是。