1. (2023高三上·常州期末)  下图1是QuickChange定点突变技术及副反应的示意图，其中的F和R代表引物，其上含有突变的碱基序列。请回答下列问题。

1. （1） 图中PCR反应体系进行时，除需要加入引物F和引物R、原始质粒、缓冲液外，还需加入的物质有。
3. （2） 已知DpnI酶是一种限制酶，能特异性识别腺嘌呤甲基化的GATC序列。由图可知，在原始质粒上有（选填“0”“1”或“很多”）个DpnI酶的切割位点。为成功获得带缺刻突变质粒，应对来自大肠杆菌的原始质粒进行的处理是。
5. （3） 图中的DH5a细胞是处于的大肠杆菌，对带缺刻突变质粒进行修复时需要添加酶。图中副反应发生的原因是新链退火时，两条新链互补配对，互为复制的，扩增出非目的片段。该技术除了图示副反应外，还存在的不足是。
7. （4） 研究人员对QuickChange定点突变技术进行了改进，在两个PCR体系中分别加入单引物F或R，具体过程下图2。

   

   ①单引物PCR1过程中，假设原始质粒有n个，每循环一次产生个双链DNA，循环30次需要个引物F。

   ②与QuickChange定点突变技术相比，单引物PCR除了能解决第（3）问中的不足，还存在的优点是