1. (2024·揭阳模拟)  病毒X为RNA病毒，有多种亚型，不易研制相应的疫苗。科研 工作者运用基因工程技术发明了一种制备病毒X活疫苗的方法，通过该方法制备的疫苗可以预防4种亚型的病毒X，该过程分为如下4个步骤。回答下列问题：

1. （1） 步骤I：改造病毒X的部分基因。该步骤可以使病毒X失去在正常宿主细胞内增殖的能力。该过程以病毒X的RNA为模板，通过逆转录获取对应的DNA片段后，再通过PCR技术扩增DNA。

   ①逆转录和PCR两个过程中利用的原料均是。

   ②科研 工作者将获取的DNA中的某些基因（不包括表面抗原基因）内个别编码氨基酸的碱基序列替换成编码终止密码子的碱基序列。与改造前相比，改造后的病毒X不能复制产生子代病毒，推测其原因可能是。

3. （2） 步骤Ⅱ：构建重组表达载体。科研 工作者将改造后的基因及4种病毒X表面抗原等其他基因一起构建重组质粒，并保存。构建表达载体时须将改造后的基因及4种病毒X的表面抗原等基因置于启动子和之间，启动子是识别和结合的位点。
5. （3） 步骤Ⅲ：构建适合改造病毒增殖的转基因宿主细胞。设计合成一种特殊tRNA的基因，其产物的反密码子能与（1）中的终止密码子配对结合，并可携带一个非天然氨基酸Uaa。将该基因与载体连接后导入宿主细胞。筛选和鉴定获得成功表达上述tRNA的转基因宿主细胞，提取宿主细胞的全部RNA，用放射性同位素标记的特殊tRNA的基因与之杂交，结果出现了RNA—RNA杂交带。该检测方法的原理是，结果说明。
7. （4） 步骤Ⅳ：利用转基因宿主细胞制备疫苗。将（2）中的重组质粒导入（3）中的转基因宿主细胞，并在补加的培养基中进行培养，则该宿主细胞能利用上述特殊tRNA翻译出改造后的病毒X基因的完整蛋白，产生大量子代病毒，该子代病毒不经灭活或减毒即可制成疫苗。与其他活疫苗相比，该疫苗无致病性，更安全，且可预防多种由病毒X引起的疾病，原因是。