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  • 1. (2024高三下·广西壮族自治区模拟)  甲胺磷是一种广谱、高效、剧毒的有机磷杀虫剂,曾被长期大量使用,引起水体、土壤污染,严重破坏了环境生态平衡,同时危害到人畜健康。利用微生物降解甲胺磷农药是解决使用甲胺磷带来的环境污染的有效途径。回答下列问题:

    1. (1) 筛选获得甲胺磷降解菌:选择长期使用甲胺磷农药的农田的土壤为样品,将获得的样品用无菌水稀释后接种于添加了的选择培养基上进行培养,可以分离出能分泌甲胺磷降解酶的细菌。甲胺磷被降解后平板上会出现透明圈,应挑取的单菌落在选择性固体培养基上进行重复划线、分离和纯化。
    2. (2) 测定甲胺磷降解率:选择三种菌株对甲胺磷进行降解,降解情况如图所示,其中降解甲胺磷效果最好的菌株是,该菌株培养时间与甲胺磷降解率的关系为

    3. (3) 构建降解甲胺磷工程菌:将提取和分离得到的甲胺磷降解酶进行氨基酸序列测定,根据得到的氨基酸序列推出,然后设计合成引物,通过技术扩增出甲胺磷降解酶基因。后经一系列过程,获得高表达的降解甲胺磷工程菌。
    4. (4) 转基因工程菌在自然界的扩散可能会带来生态风险。为此,科研人员利用以下材料,设计了可被诱导而自毁的甲胺磷工程菌。所需材料和结构有:

      ①质粒

      ②IPTG(一种模拟异乳糖的试剂,可去除lac启动子中的阻遏物以诱导基因表达)

      ③lac启动子

      ④核酸水解酶基因

      其具体设计思路是将(填序号)构建成重组载体,导入工程菌。需自毁时外源增加(填序号)进行诱导,引发甲胺磷工程菌自毁。

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