1. (2024高二下·东莞月考)  半乳糖血症是单基因遗传病，科学家将正常基因D导入该病患者的细胞，以治疗该病。图甲为A、B、C三种质粒，图乙为含有目的基因D的DNA片段，图丙为重组载体的示意图。Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质，使菌落呈蓝色，EcoR I（0.6Kb）、Pvu I（0.8Kb）为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。请回答：

1. （1） 基因工程操作的核心步骤是。图甲中三种质粒适宜作为运载体的是质粒，与另外两种质粒相比，其作为载体的优点是。
3. （2） 为了提高实验成功率，需要通过技术扩增目的基因，以获得目的基因的大量拷贝，该技术原理为。
5. （3） 获取目的基因D时应选择乙图中的对其所在的DNA进行切割。将目的基因D和甲图中相应质粒连接后，得到图丙中三种方式。为选出正向连接的重组质粒，使用对质粒完全酶切后，进行电泳分析。若是正向连接载体，电泳图谱中出现长度为Kb和5.5 Kb两条带。