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  • 1. (2024高二下·定海月考)  病毒侵染植物时,植物识别外源的核酸并启动一系列的调控机制来降解病毒的RNA。研究人员改造病毒载体,使其携带目的基因cDNA后侵染植物,最终特异性降解目的基因mRNA,即病毒诱导的基因沉默技术(VIGS),RNA病毒TSWV能侵染辣椒,科研人员推测用VIGS技术沉默TSWV的N基因可使辣椒抵抗TSWV,进行如下实验。

    1. (1) 用改造的病毒TRV作为载体,与TSWV的N基因连接,构建重组载体TRV—N(如下图),通过农杆菌转化法导入辣椒细胞。请完善制备TRV—N的技术路线:获取N基因的mRNA→→PCR→→连接成TRV—N。

    2. (2) C基因是类胡萝卜素合成关键酶的基因,当类胡萝卜素合成途径被阻断,植物出现白化现象。用上述方法构建重组载体TRV—C并导入辣椒细胞,作为构建沉默体系的对照。若辣椒出现白化表型,说明
    3. (3) TSWV侵染辣椒植株会使其叶片出现明显的褪绿、黄化斑等症状,以易感TSWV的辣椒作为实验材料,实验分组及处理如下表。

      组别

      实验处理

      第1组

      第2组

      第3组

      导入TRV—C

      +

      导入TRV—N

      +

      +

      +

      注:+代表添加,—代表不添加

      ①表中“?”的处理为

      ②为使实验结果更准确,除设置空白对照组外,还应该增加第4组,其实验处理为

      ③观察各组辣椒叶片状态和颜色,若结果为,则说明沉默TSWV的N基因可使辣椒抵抗TSWV。

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