1. (2024高三下·南宁月考) 纳米抗体具备体积小、结构简单、稳定性显著等优点，而带荧光蛋白的纳米抗体可以帮助我们了解蛋白质在细胞或生物体内的定位和功能，荧光-抗体融合复合物可作为靶向生物分子进行疾病诊断和治疗等。为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达，运用重组酶技术构建质粒。重组酶技术指的是重组酶通过识别两个DNA片段上的特定相同序列，将不同DNA片段连接，从而实现DNA重组，如下图1所示。请回答下列问题：

1. （1） 分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时，配制的两个反应体系中不同的有。
3. （2） 有关基因序列如下图2。引物F2-F、F1-R应在下列选项中选用。

   

5. （3） 将PCR产物片段与线性质粒载体混合后，在重组酶作用下可形成环化质粒，之后转化大肠杆菌。这一过程与传统重组质粒构建过程相比，无需使用的酶主要有。
7. （4） 如图1所示，转化后的大肠杆菌需选择培养基进行筛选，下列叙述正确的有____。

   A . 是否产生氨苄青霉素可作为筛选大肠杆菌是否转化的依据 B . 转化后的大肠杆菌需培养一段时间后接种至选择培养基进行筛选 C . 将梯度稀释后的菌液用接种环在培养基表面进行划线获得单菌落 D . 选择培养基上常常会出现大量杂菌形成的菌落
9. （5） 为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计，用不同菌落的质粒为模板，用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增，质粒P1~P4的扩增产物电泳结果如图3。根据图中结果判断，可以舍弃的质粒有。

   

11. （6） 对于PCR产物电泳结果符合预期的质粒，通常需进一步通过基因碱基序列测定确认，原因是。