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  • 1. (2024高二下·鹤山月考)  某污水处理厂欲处理一批含As3和硝酸盐浓度较高的污水,研究人员通过对肠道微生物的分离与筛选,得到了耐砷的反硝化细菌,它在厌氧条件下能够将硝酸盐还原为N2O和N2。分离耐砷的反硝化细菌具体步骤如下:

    采集健康人体的新鲜粪便样本。

    1. (1) 配制培养基以筛选:该培养基中含有适宜浓度的,从而有利于该菌的生长,抑制其他微生物的生长。此种培养基属于培养基。

      接种:取采集的人体新鲜粪便样品0.3 g,接种至该培养基上。

    2. (2) 耐砷反硝化细菌的分离与纯化:取200~300μL上述培养液,均匀地涂布在已经添加了5 mmol/L As3和10 mmol/L NO3-的细菌固体培养基上。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是;涂布完成后,将平板置于温度为的恒温培养箱中培养24 h。挑取长势比较良好、形态大小不同的菌落利用平板划线法进行分离纯化,用该种方法进行接种时,接种工具是,该接种工具的灭菌方法是。操作时,在第二次及其以后的划线时,总是从上一次划线的开始划线,目的是

      对分离纯化后的菌株进行鉴定。

    3. (3) 测定菌株在不同砷浓度下的生长、繁殖能力:挑取单菌落加入到液体培养基中进行培养,吸取1 mL菌液离心收集菌体后,分别接种到含有0 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L As3和10 mmol/L NO3-的液体培养基中,测定其OD值(OD值越大,表明菌体数量越多),并绘制曲线如下图。结合曲线可以得出结论:

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