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  • 1. (2024高二下·华蓥月考)  2019年新冠疫情爆发以来,疫情防控成为社会关注的热点问题。下图所示某科研团队运用基因工程研制新冠病毒疫苗的过程。质粒中lacZ基因编码的酶可以分解X-ga产生蓝色物质,使菌落呈现蓝色,否则菌落为白色。回答下列问题:

    1. (1) 获取目的基因时,首先提取新冠病毒的RNA,再通过过程获得cDNA(互补DNA),并可借助特异性引物通过PCR扩增图中的片段,PCR的原理是,其中引物的作用是,若一个含有目的基因的DNA扩增n代,则共消耗对引物。
    2. (2) 图中过程①有两种限制酶选择方案(注:图中几种限制酶切割产生的末端不同):方案一:选用BamHI一种限制酶:方案二:选用两种限制酶:方案二优于方案一的原因是既能防止质粒和目的基因的自身环化,又能保证目的基因和质粒的正向连接。
    3. (3) 将重组质粒导入大肠杆菌之前,需要用一定浓度的Ca2+处理大肠杆菌,使细胞处于。筛选含重组质粒的大肠杆菌时,须在培养大肠杆菌的通用培养基中加入,培养一段时间后,挑选出色的菌落进一步培养获得大量目的菌。

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