1. (2024高二下·广安月考) Leber遗传性视神经病是一种严重的遗传病，患者线粒体内的ND4基因发生突变，患病基因由母亲传给孩子。目前常用“三亲婴儿”的方法帮助女性患者生下健康婴儿。“三亲婴儿”需取志愿者的去核卵细胞作为细胞质的来源，构建健康受精卵的流程简图如下。回答下列问题：

1. （1） “三亲婴儿”的诞生需依次用到核移植、体外受精、胚胎体外培养和等技术，属于有性生殖。该过程不能直接用女方的体细胞作为核供体的原因是。
3. （2） 某研究小组欲克隆ND4基因并研究其表达的蛋白，选用了下图所示的质粒进行实验。

   

   ①据图分析，利用PCR扩增ND4基因时，应当挑选的引物是；若已知其中的一种引物，能否依据已知的引物碱基序列设计出另一种引物?，理由是。为构建重组质粒，据图判断，需通过设计引物使PCR产物的两端带有质粒上限制酶的酶切位点，

   ②为了使ND4基因在大肠杆菌内高效表达，所用启动子应选择（填“细菌”或“真核细胞”）的，这样有利于大肠杆菌的RNA聚合酶与之结合。获得重组质粒后，可将其导入经处理过的大肠杆菌。用（从物理性质上分）培养基对含ND4基因的大肠杆菌进行扩大培养，合成ND4蛋白。

   ③实验完成后，剩余细菌、使用过的培养基等均需经灭菌处理再统一废弃，原因是。