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科研人员采用了如图2所示的巢式PCR技术获取抗虫基因,巢式PCR是一种变异的聚合酶链式反应(PCR),使用两对PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物(也称外引物)扩增片段和普通PCR相似。第二对PCR引物称为巢式引物(因为其在第一次PCR扩增片段的内部,也称内引物),结合在第一次PCR产物内部,使得第二次PCR扩增的片段短于第一次扩增的。相比于常规PCR,巢式PCR获得的目标产物特异性更强。
①PCR扩增加入的缓冲液中含有Mg2+ , 其作用是,在最后一个循环中通常还需要维持在72℃条件下5min,其目的是。
②图2中由中间产物获得目标产物,至少需要经过次变性。