1. (2024高二下·淮安期末) 抗菌肽具有抗菌谱广、不易产生耐药性等优点，有望成为抗生素替代品。下图1为构建拟穴青蟹抗菌肽（scy）和大黄鱼抗菌肽（hepc）共表达载体的部分示意图。ccdB 基因编码毒性蛋白，会导致细胞死亡。请据图回答问题：

1. （1） 为构建融合基因Scy-hepc需要进行PCR 扩增，反应体系中需加入模板、缓冲液（含Mg²⁺）、引物、等。PCR1和PCR2在反应程序上最主要的区别是。融合基因构建过程中发生的变异类型属于。
3. （2） 为鉴定PCR产物需进行电泳检测，根据检测结果，对含有单一目的片段的凝胶进行切割，目的是对 DNA进行并回收，便于后续测序。
5. （3） 构建基因表达载体过程中需使用BP和LR 重组酶，相当于传统酶切构建法中的酶。与传统酶切中使用两种限制酶切割目的相同，重组前还需在 Scy序列的上游添加attBl序列，在hepc序列下游添加attB2序列的目的是。载体PMDC85中作为标记基因，可快速筛选转化成功的农杆菌。
7. （4） 将重组植物表达载体导入用处理的农杆菌，转化小球藻。转化前需用酶对小球藻进行处理获得原生质体。可通过观察初步检测融合基因是否成功表达。若要进一步确定表达的蛋白为Scy-hepc 可采用技术检测。
9. （5） 将鉴定阳性的小球藻和野生型小球藻总蛋白提取液分别加入嗜水气单胞菌和金黄色葡萄球菌的培养基，结果如图2所示。通过比较可知重组融合蛋白对两种菌都有一定的抑制效果。