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  • 1. (2024高二下·闽侯期末) 肌肉生长抑制素(MSTN)可抑制成肌细胞的增殖,该基因突变能引起骨骼肌含量增加,产生“双肌”症状。科研人员为获得“双肌”表型的山羊,利用基因编辑技术突变山羊的MSTN基因,实现了MSTN基因表达沉默或表达产物失活,然后构建基因表达载体,转染山羊胎儿成纤维细胞,筛选MSTN基因突变的细胞株作为供核细胞,再进行体细胞核移植,获得“双肌”表型的克隆羊。回答下列问题:

    1. (1) 通过向细胞中导入MSTN基因的反义基因也可实现MSTN基因表达沉默,即将MSTN基因反向连接到质粒上,推测反义基因能导致基因表达沉默的机理是。在构建基因表达载体时,若采用同种限制酶对目的基因和质粒分别进行切割后连接,可能出现的结果有(写出三种情况),因此需要对重组质粒进行筛选。
    2. (2) 通过无菌手术取35日龄的山羊胎儿组织,再用酶处理,使其分散成单个细胞,但要严格控制处理时间,其原因是,并制成细胞悬液进行培养。
    3. (3) 采用的方法将目的基因导入山羊胎儿成纤维细胞,利用方法可筛选出MSTN基因突变的细胞株作为供核细胞,再依次通过(答三点)技术,最终获得具有“双肌”表型的山羊。

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