1. (2024高二下·杭州期末) 科研人员利用免疫缺陷兔，利用某种含氯霉素抗性基因的载体（BAC）构建转入SIRPα（hSIRPα）基因人源化动物模型。回答下列问题：

1. （1） BAC-hSIRPα质粒的提取。用接种环将保存的BAC-hSIRPα质粒的菌液和普通菌液通过法分别接种于含的LB固体培养基，37℃过夜培养后检查平板中菌落的生长情况，其中为阳性菌板。
3. （2） 的构建。BAC质粒能装载较大的人源基因组序列，因此常被用于构建基因人源化动物模型。将成功转化的成纤维细胞的核取出，移入去核的卵母细胞中，电刺激融合后进行，将早期胚胎移植到经处理的代孕母兔子宫内。经妊娠、分娩获得转基因克隆兔。
5. （3） 转基因兔外源基因拷贝数的检测。将从转基因兔体内提取的DNA和等量标准样品，用特异性引物进行实时荧光定量PCR（qPCR），qPCR中加入了荧光染料，荧光强度与双链DNA数量成正比，每个循环检测荧光强度，其达到标准值所需的循环数称为Ct值。若标准样品Ct值为22，提取DNA的Ct值为24，说明标准样品是提取DNA中含外源基因量的倍。当PCR循环到一定次数时，会出现“平台期”，即荧光强度不再增加，此时限制因素可能是（答出2点）。
7. （4） 转基因兔外源基因表达水平检测。通过qPCR相对定量法检测hSIRPα基因的mRNA表达水平，各种组织中表达水平如图所示。据图可知，转基因兔中hSIRPα基因的mRNA表达水平在组织中最低；在组织中显著高于野生型兔。