1. (2024高三上·浙江月考) 为研究胰腺A蛋白的生理功能，科研人员利用基因工程技术构建了A基因胰腺特异性敲除模型小鼠。

1. （1） 利用如图载体构建A基因中有LoxP序列的小鼠。图中载体与A基因颜色相同的区域序列相同。通过同源臂使载体与A基因上的对应相同序列发生片段互换，将LoxP整合到A基因上得到A'基因，A'基因与A基因功能相同。

   

   将载体导入（细胞）中，获得了基因型为AA'的杂合鼠。

3. （2） 来自于噬菌体的Cre酶可将它所在细胞中含LoxP序列的基因敲除。研究人员将1个Cre酶基因与特异性启动子拼接，使其仅在小鼠表达。特异表达Cre酶的小鼠称为C鼠。

   以下是利用AA'杂合鼠和C鼠杂交获得A基因胰腺特异性敲除鼠的操作过程，并利用小鼠尾部细胞检测杂交后代基因型。（注：A和Cre酶基因位于小鼠的不同染色体上）

   ①第一批杂交：AA'鼠分别与AA'鼠、C鼠杂交，在子一代中筛选，获得两类鼠：鼠和鼠。

   ②第二批杂交：将第一批杂交筛选获得的两类鼠进行一次杂交，获得多只小鼠，其中含有A基因胰腺特异性敲除小鼠占。利用PCR的方法检测这些小鼠尾部细胞的基因型，引物（P1~P6）及产物电泳结果如下图所示。

      

   得到B图甲的电泳结果，A图P1~P4中应选择的一对引物是，其中1、2为；3—10号小鼠中，只含A'基因的有，可实现A基因胰腺特异性敲除的有。

5. （3） 将纯合A'A'鼠（无Cre酶）与第二批杂交筛选得到的A 基因胰腺特异性敲除的小鼠进行杂交，出生的后代有、无Cre酶的小鼠数量之比接近时，说明胰腺中A基因特异性敲除的小鼠可正常出生，无胚胎致死，利于在后续研究中应用。用遗传图解表示此杂交过程（无Cre酶基因转入用C^-表示，有Cre酶基因转入用C⁺表示）。