1. (2024高二上·怀化期中) 抗菌肽是一类具有广谱抗菌、抗病毒等功能的小分子多肽，细菌不易对其产生耐药性且无残留等，被认为是理想的抗生素替代品。为了突破抗菌肽在畜禽养殖业广泛应用的瓶颈，我国研究人员运用小分子泛素蛋白（SUMO）融合技术将含有重组抗菌肽LLv基因的质粒导入大肠杆菌，表达融合蛋白SUMO-LLv，并优化了表达条件，从而能高效获得重组抗菌肽 LLv。所用质粒含有卡那霉素抗性基因(Kan^R)、LacZ基因及SacⅠ、XhoⅠ酶切位点等，其结构和构建重组质粒的过程如图1所示。据此分析回答以下问题：

注：LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色；否则菌落为白色。

1. （1） 扩增LLv基因时，PCR反应体系中含有的酶有；已知该基因序列不含图1中限制酶的识别序列，为了使其能与已被酶切的质粒连接，需根据设计引物。
3. （2） LLv基因以a链为转录模板链，转录时mRNA自身的延伸方向为5'→3'。该基因内部没有SacⅠ、XhoⅠ这两种酶切位点。图1中酶切位点1和2所对应的酶分别是。
5. （3） 将重组质粒导入大肠杆菌时，需用CaCl₂处理大肠杆菌，其目的是。
7. （4） 为了将成功导入重组质粒的大肠杆菌筛选出来，甲同学在添加了卡那霉素、X-gal等成分的培养基中进行接种，结果如图2，该同学采用的接种方法是。图2中出现的菌落即成功导入重组质粒的大肠杆菌菌落，判断的理由是。