1. (2018高三上·七台河期末) 拟南芥某突变体可用于验证相关基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色（TT），某突变体的种皮为黄色（tt）。下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因（Tn）功能的流程示意图。据图回答下列问题：

1. （1） 形成①的过程中需要酶；Tn基因能够和质粒连接成①的主要原因是。
3. （2） 酶切后的基因中含有个游离的磷酸基团；目的基因导入受体细胞的方法有很多种，题中所用的是；采用PCR技术扩增目的基因时，需在PCR反应体系中加入引物、酶等物若共用了引物62个，则目的基因扩增了代。
5. （3） 若②不能在含抗生素Kan的培养基上生长，其原因可能是。若转基因拟南芥的种皮颜色为，则说明油菜Tn基因与拟南芥T基因的功能可能相同。