1. (2018·温州模拟) 欲研究细胞在培养瓶中培养适当时间后，产生的细胞总数、集落数与原培养细胞浓度的关系（集落是指贴壁生长的细胞增殖6代以上形成的细胞群体，肉眼可见），请完善实验思路，预测实验结果并进行分析与讨论。

材料与用具：未知浓度的X细胞悬液，动物细胞培养液，培养瓶若干，C0₂培养箱，血细胞计数板，显微镜，移液器，胰蛋白酶，染色剂等。

（要求与说明：细胞和集落计数、染色等具体过程不作要求，所用试剂的剂量不作要求，营养均满足要求，各种条件适宜）

1. （1） 完善实验思路：

   ①；

   ②据思路①，用动物细胞培养液稀释获得1000个/5mL、800个/5mL、600个/5mL、400个/5mL、200个/5mL、100个/5mL6种浓度的X细胞悬液；

   ③分别取5mL上述配制的6种浓度的X细胞悬液加到培养瓶中，每种浓度设若干重复样品，放入CO₂培养箱中培养3周后，去除培养液并染色；

   ④；

   ⑤；

   ⑥。

3. （2） 预测实验结果：

   若已知200个/5mL至800个/5mL浓度间，产生的集落数与原培养细胞浓度呈线性关系，但低于200个/5mL或高于800个/5mL的浓度将会偏离，请建立一个坐标系并画出集落数与原培养细胞浓度关系曲线。

5. （3） 分析与讨论：

   ①高于800个/5mL的浓度会偏离线性关系的原因是。

   ②低于200个/5mL会偏离线性关系的原因是，欲解决这种情况，可预先在培养瓶中制备一层细胞，以支持生长来提高效率。