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高中生物学
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1.
(2018·全国Ⅱ卷)
某种荧光蛋白(GFP)在紫外线或蓝光激发下会发出绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP基因的5’末端,获得了L1-GFP融合基因(简称甲),并将其插入质粒PO。构建了真核表达载体P1,其部分结构和酶切点的示意图如下,图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。
回答下列问题:
(1) 据图推断,该团队在将甲插入质粒PO时,使用了两种限制酶,这两种酶是
.使用这两种酶进行酶切是为了保证
,也是为了保证
.
(2) 将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色的荧光,则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了
和
过程。
(3) 为了获得含有甲的牛,该团队需要做的工作包括:将能够产生绿色荧光细胞的
移入牛的
中,体外培养,胚胎移植等。
(4) 为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的
(填”mRNA””总RNA”或”核DNA”)作为PCR模板。
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